Tinción Gram
La tinción de gram tiene 4
colorantes, los cuales son: violeta, lugor, alcohol y fuccina.
Su función es
colorear.
En un portaobjetos ponemos
una gota de agua, luego se esteriliza el asa, tomando la muestra del cultivo,
se realiza un frotis con el asa en le porta objetos, se fija el portaobjetos en
la llama, ya fijada, se colorea con el primero colorante que es el violeta, se
colorea por un minuto y después lo lavo con agua destilada, después se colorea
con el lugor, que va a fijar más la muestra, también se debe lavar con agua,
luego se decolora con el alcohol acetona, cada paso se deberá lavar con agua,
el cuarto paso es re colorear con fuccina para que queden coloreadas las
bacterias gram negativas y nuevamente se lava con agua, por último paso de
lleva la muestra ya coloreada al microscopio.
Tinción de ácido resistencia
(Ziehl-Neelsen)
Separa a las bacterias en
dos grupos, las que son resistentes al acido alcohol y las que no lo son.
Este tipo de tinción es muy
importante porque muchas de las bacterias del pequeño grupo de las resistentes
al acido alcohol son patógenas como micobacterium leprae o microbacterium
tuberculosos.
En la realización del
procesos se pone una muestra de una bacteria
no patógena resistente al acido junto con una bacteria resistente al
acido.
El primer paso es mezclar
ambas bacterias en un portaobjetos, tras dejar fijas con la llama, la
cubriremos con fuccina fedicada.
Para teñir las bacterias y
para que el colorante penetre las bacterias, calentaran la preparación durante
7 min con un hisopo humedecido en alcohol y pasado por la llama, se calentara
la preparación hasta que el colorante empieza a humear y se repetirá esta
acción hasta que deje de hacerlo, si el colorante se evapora se deberá de
añadir porque la preparación no se debe quedar seca. Transcurrido los 7 min, se
lavara la preparación y se decolorara la muestra con la solución de alcohol
ácido clorhídrico durante 15 segundos, se volverá a lavar la preparación con
agua y se teñirá con azul de metileno por 1 minuto.
Finalmente se lavara con
agua la preparación y se dejara secar, se observara el resultado de la tinción
al microscopio.
La bacterias acido
resistentes aparecerán teñidas de rojo y las bacterias sensibles de azul.
Tnción simple
Es esta técnica, el
procedimiento será nadamas administrar un colorante a la muestra, donde teñirá
todas las células, proporcionando información sobre el tamaño, forma y
agrupación de los microorganismos.
El material que se requiere,
es un portaobjetos, una asa bacteriológica, mechero, bandeja, puente de vidrio,
piseta con agua de la llave y un frasco con colorante
El procedimiento es una vez
realizado el frotis y fijarlo se inicia la técnica de tinción simple, se coloca
el frotis en el puente, se agrega unas gotas del colorante hasta cubrir la
preparación, evitando que escurra el colorante se deja por 1 minuto, después se
escurre el exceso de colorante, se lava en agua hasta que salga incolora, el
frotis tenido se deja secar en un papel absorbente, una vez seca la muestra se
ve en el microscopio, en caso de bacterias se agrega una gota de aceite de
inversión. La bacterias observadas pueden ser cocos, basilos, vivrios o
espirilos, Su agrupación puede ser el pares como dimplococos y dimplobasilos.
En grupos de 4 o tétradas o en cadenas
como los estreptococos y estreptovacilos. En racimos o pueden no tener
una agrupación no definida. Una vez terminada la observación , se coloca el
portaobjetos en un recipiente con agua desinfectante para su lavado
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